嬰幼兒配方奶粉中核苷酸含量測定

嬰幼兒奶粉中核苷酸的檢測

樣品制備：

精密稱取奶粉 5.0 g，加適量溫水，超聲 10 min 使溶解，加 10%醋酸溶液 5 mL，搖勻，靜置，再加水定容至 50 mL，搖勻，過濾，取上清液待用。

樣品凈化：

SPE 小柱：Polyclean X-HLB 60mg/3mL（貨號：9B-P001-06030）

活化：甲醇 3 mL

平衡：水 3 mL

上樣：2 mL 待凈化液

沖洗：20%甲醇/水溶液 3 mL

合并上樣流出液與沖洗流出液，再加水定容至 5 mL，作為待測溶液。

HPLC 測定：

色譜柱：Titank C18 5μm 250×4.6mm （貨號： FMG-5560-EONU）

流動相：0.1 M K2HPO4 溶液（用磷酸調(diào)節(jié) pH 值至 5.6）為流動相A；乙腈為流動相B

流 速 ：1 mL/min

進(jìn)樣體積：5 μL

檢測波長：260 nm

溫度：常溫

梯度：

時間(分鐘)	流動相 A(%)	流動相 B(%)
0	100	0
8	100	0
25	95	5
27	75	25
40	75	25

5 種核苷酸混標(biāo)圖譜

Polyclean X-HLB 凈化后嬰兒配方奶粉圖譜